டிரிப்சினுக்கான எலிசா கிட்

மறுசீரமைப்பு டிரிப்சின் உயிரி மருந்து தயாரிப்பில்-செல் தயாரிப்பின் போது அல்லது தயாரிப்புகளை மாற்றியமைக்கவும் செயல்படுத்தவும் அடிக்கடி பயன்படுத்தப்படுகிறது.டிரிப்சின் பாதுகாப்பு அபாயங்களை ஏற்படுத்துகிறது, எனவே இறுதி தயாரிப்பு வெளியீட்டிற்கு முன் அகற்றப்பட வேண்டும்.இந்த சாண்ட்விச் கிட், டிரிப்சின் பயன்படுத்தப்படும் போது உயிரி மருந்து உற்பத்தியில் செல் கலாச்சார சூப்பர்நேட்டன்ட் மற்றும் பிற செயல்முறைகளில் எஞ்சிய டிரிப்சினின் அளவு அளவீடு ஆகும்.

இந்த கருவி என்சைம்-இணைக்கப்பட்ட இம்யூனோசார்பன்ட் அஸ்ஸே (ELISA) ஆகும்.தகடு போர்சின் டிரிப்சின் ஆன்டிபாடியுடன் முன்கூட்டியே பூசப்பட்டுள்ளது.மாதிரியில் இருக்கும் டிரிப்சின் சேர்க்கப்பட்டு கிணறுகளில் பூசப்பட்ட ஆன்டிபாடிகளுடன் பிணைக்கிறது.பின்னர் பயோடைனிலேட்டட் போர்சின் டிரிப்சின் ஆன்டிபாடி சேர்க்கப்பட்டு, மாதிரியில் உள்ள டிரிப்சினுடன் பிணைக்கிறது.கழுவிய பின், HRP-Streptavidin சேர்க்கப்பட்டு, Biotinylated tripsin ஆன்டிபாடியுடன் பிணைக்கிறது.அடைகாத்த பிறகு, கட்டுப்பாடற்ற HRP-ஸ்ட்ரெப்டாவிடின் கழுவப்படுகிறது.பின்னர் TMB அடி மூலக்கூறு கரைசல் சேர்க்கப்பட்டு, HRP ஆல் வினையூக்கி, அமில நிறுத்தக் கரைசலைச் சேர்த்த பிறகு மஞ்சள் நிறமாக மாறும் நீல நிற தயாரிப்பை உருவாக்குகிறது.மஞ்சள் நிறத்தின் அடர்த்தியானது டிரிப்சினின் இலக்கு அளவுக்கு விகிதாசாரமாகும்
மாதிரி தட்டில் பிடிக்கப்பட்டது.உறிஞ்சுதல் 450 nm இல் அளவிடப்படுகிறது.