மறுசீரமைப்பு டிரிப்சின்
டிரிப்சின் குறிப்பாக லைசின் மற்றும் அர்ஜினைனின் சி-டெர்மினல் பெப்டைட் பிணைப்புகளை பிளவுபடுத்துகிறது, இது இன்டர்செல்லுலர் பிணைப்பு புரதங்களை சிதைக்கும்.ஹைசென் பயோடெக் தயாரித்த மறுசீரமைப்பு டிரிப்சினின் அமினோ அமில வரிசையானது போர்சின் கணையத்தில் இருந்து பெறப்பட்ட டிரிப்சினின் அதே வரிசையாகும், மேலும் இது மறுசீரமைப்பு எஸ்கெரிச்சியா கோலி வெளிப்பாடு மூலம் தயாரிக்கப்படுகிறது.தடுப்பூசிகள், ஸ்டெம் செல்கள், நோயெதிர்ப்பு உயிரணு சிகிச்சை, மருந்து பரிசோதனை, ஆன்டிபாடிகள் மற்றும் பிற துறைகளில் செல் செரிமானத்திற்காக டிரிப்சின் பாரம்பரிய பிரித்தெடுத்தலை மாற்றலாம்.அப்ரோடினின், சோயாபீன் ட்ரிப்சின் இன்ஹிபிட்டர் போன்றவை டிரிப்சின் செயல்பாட்டைத் தெளிவாகத் தடுக்கும்.
ரீகாம்பினன்ட் டிரிப்சின் இயற்கையாக பிரித்தெடுக்கப்பட்ட டிரிப்சினின் அதே பண்புகளைக் கொண்டுள்ளது.இந்த தயாரிப்பு GMP தர பட்டறையில் தயாரிக்கப்படுகிறது.நொதித்தல், சுத்திகரிப்பு மற்றும் இறுதிப் பொருட்களில் விலங்கு மூலப்பொருட்கள் பயன்படுத்தப்படுவதில்லை.அதே நேரத்தில், உற்பத்தி மற்றும் தரக் கட்டுப்பாட்டு செயல்முறைகள் சரிபார்க்கப்படுகின்றன, இதன் விளைவாக தொகுதிகளுக்கு இடையே அதிக நிலைத்தன்மை ஏற்படுகிறது.
பொருளின் பண்புகள்
CAS | 9002-07-7 |
EC | |
பாத்திரம் | வெள்ளை அல்லது வெள்ளை நிற படிக சக்தி |
மூலக்கூறு எடை | 24kDa |
ஐசோ எலக்ட்ரிக் புள்ளி | 8.26 |
தூய்மை (RP-HPLC) | β-டிரிப்சின்≥70.0%;α-டிரிப்சின்≤20.0% |
குறிப்பிட்ட செயல்பாடு | ≥3800.0U/mg புரதம் (BAEE) |
மறுசீரமைப்பு டிரிப்சின் செயல்பாடு | ≥2500.0U/mg சக்தி (BAEE) |
அடையாளம் | ஊதா |
உகந்த pH | 8.0 |
பயோபர்டன் | ≤300CFU/g |
ஈ. கோலி ஹோஸ்ட் செல் புரத எச்சம் | ≤0.01% |
E. கோலிஹோஸ்ட் செல் டிஎன்ஏ எச்சம் | ≤10.0000ng/mg |
எண்டோடாக்சின் உள்ளடக்கம் (LAL-டெஸ்ட்) | ≤20.0EU/mg |
புரத உள்ளடக்கம் | 95.0% ±10.0% |
களஞ்சிய நிலைமை
சேமிப்பகத்தின் நிலைத்தன்மை: மறுசீரமைப்பு டிரிப்சின் லியோபிலைஸ் செய்யப்பட்ட சக்தி 2-8℃ க்கு கீழ் சேமிக்கப்பட வேண்டும்.இது 24 மாதங்களுக்குள் நிலையானது.1mM HCl அல்லது 50mM HAC உடன் கரைத்த பிறகு, அது -25 ~ - 15℃ கீழ் சேமிக்கப்பட வேண்டும்.10 முறை மீண்டும் மீண்டும் உறைபனி மற்றும் தாவிங்கிற்குப் பிறகு இது செயல்பாடு இழப்பு இல்லை.
அலகு வரையறை
25℃, pH 7.6, 3.2ml எதிர்வினை தீர்வு (1cm ஒளி பாதை), ஒரு டிரிப்சின் அலகு (U) நிமிடத்திற்கு BAEE இன் நொதி நீராற்பகுப்பு மூலம் 253nm இல் உறிஞ்சுதல் மதிப்பில் 0.003 அதிகரிப்பு என வரையறுக்கப்பட்டது.
தர கட்டுப்பாடு
செயல்பாடு: மக்கள் சீனக் குடியரசின் பார்மகோபோயாவால் டிரிப்சினின் செயல்பாட்டைத் தீர்மானித்தல் தொகுதி 4 (2020 பதிப்பு).
.E. கோலி தொகுப்பாளர் செல் புரத எச்சம்: ELISA கிட்.சீன மக்கள் குடியரசின் பார்மகோபோயியா தொகுதி 4 (2020 பதிப்பு) -E. கோலி ஹோஸ்ட் செல் புரத எச்சம் (3412).
.புரத தூய்மை: சீன மக்கள் குடியரசின் மருந்தியல் தொகுதி 4 (2020 பதிப்பு)-HPLC முறைக்கான பொது விதிகள் (0512).
. பயோபர்டன்: சீன மக்கள் குடியரசின் மருந்தியல் தொகுதி 4 (2020 பதிப்பு)-மலட்டுத்தன்மை சோதனைக்கான பொது விதிகள் (1101).•இ - கோலிஹோஸ்ட் செல் டிஎன்ஏ எச்சம்e: பீப்பிள்ஸ் ரிபப்ளிக் ஆஃப் சீனாவின் பார்மகோபோயா தொகுதி 4 (2020 பதிப்பு) ஹோஸ்ட் செல் டிஎன்ஏ எச்சங்கள் (3407).. எண்டோடாக்சின் உள்ளடக்கம்: பீப்பிள்ஸ் ரிபப்ளிக் ஆஃப் சீனாவின் பார்மகோபோயா தொகுதி 4 (2020 பதிப்பு)-LAL-டெஸ்டுக்கான பொது விதிகள் (1143).
தயாரிப்பு அறிவுறுத்தல்
1.தீர்வு தயாரித்தல்: COA இன் புரத உள்ளடக்கத்திற்கு (சக்தி செயல்பாடு மற்றும் புரதச் செயல்பாட்டின் மூலம் கணக்கிடப்படுகிறது) சரியான அளவு டிரிப்சின் எடுத்து, HBSS சமநிலை தீர்வு (அல்லது செல் செரிமானத்திற்கு ஏற்ற பிற இடையகத்தை சேர்க்கவும். தேவைப்பட்டால், இறுதி செறிவுக்கு EDTA ஐ சேர்க்கவும். 0- 1mM, 2mM ஐ விடாமல் இருப்பது நல்லது).பரிந்துரைக்கப்பட்ட டிரிப்சின் செறிவு சுமார் 0. 1-0.3mg/mL (வெவ்வேறு செல்களுக்கு ஏற்ப செறிவு சரிசெய்யப்படுகிறது), மற்றும் மெதுவாக கலக்கப்படுகிறது;இந்த படிநிலையை அறை வெப்பநிலையில் இயக்க முடியும்.
2. டிரிப்சின் கரைசலை வடிகட்ட 0.22μm வடிகட்டியைப் பயன்படுத்தவும் மற்றும் அதை ஒரு மலட்டு கொள்கலனுக்கு மாற்றவும்;இந்த நடவடிக்கை அறை வெப்பநிலையில் இயக்கப்படலாம்.
3. வடிகட்டிய டிரிப்சின் கரைசலை அன்றைய தினம் தேவைக்கேற்ப நேரடியாகப் பயன்படுத்த வேண்டும் (உதாரணமாக, T25 பாட்டில்களில் 1mL சேர்ப்பது, 37°C இல் செல்களை ஜீரணிப்பது), மற்றும் திரவத்தை 2-8°C வெப்பநிலையில் 1-2 வாரங்களுக்கு சேமிக்கலாம். .
4. நீண்ட கால சேமிப்பு: தயாரிக்கப்பட்ட மறுசீரமைப்பு உயிரணு செரிமானக் கரைசலை நீண்ட நேரம் சேமித்து வைக்க வேண்டும் என்றால், அதை 12 மாதங்களுக்கு -25~- 15°C வெப்பநிலையில் நிலையாக சேமிக்கலாம்.
தயாரிப்பு பயன்பாடு
கலத்திற்கு கலாச்சாரம்
• திசு தடுப்பு செரிமானம், முதன்மை செல் கையகப்படுத்தல்.
• ஒட்டிய உயிரணுக்களின் பாதை செரிமானம்.
• மைக்ரோ கேரியர் முறை மூலம் செல் கலாச்சாரம்.
• ஸ்டெம் செல்களை மெதுவாக ஜீரணிக்கும்.
• நோயெதிர்ப்பு செல் சிகிச்சை, முதலியன.
மறுசீரமைப்பு புரதத்திற்கு:
.மறுசீரமைப்பு இன்சுலின் உற்பத்தி.
.புரத வரிசைமுறை, பெப்டைட் மேப்பிங்.
.புரோட்டியோமிக்ஸ் ஆராய்ச்சி போன்ற குறிப்பிட்ட புரோட்டியோலிடிக் செயல்முறைகள்.
தற்காப்பு நடவடிக்கைகள்
.கனிம உப்புகளின் அதிக செறிவு செயல்பாட்டில் வெளிப்படையான விளைவைக் கொண்டிருக்கிறது.
.பிற புரத தயாரிப்புகளுடன் தொடர்பைத் தவிர்க்கவும்.
.உங்கள் பாதுகாப்பு மற்றும் ஆரோக்கியத்திற்காக, ஆய்வக கோட் மற்றும் கையுறைகளை அணியுங்கள்