பிஎஸ்டி 2.0 டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் (கிளிசரால் இல்லாதது)
Bst DNA பாலிமரேஸ் V2 ஆனது பேசிலஸ் ஸ்டீரோதெர்மோபிலஸ் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் I இலிருந்து பெறப்பட்டது, இது 5′→3′ டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் செயல்பாடு மற்றும் வலுவான சங்கிலி மாற்று செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது, ஆனால் 5′→3′ எக்ஸோநியூக்லீஸ் செயல்பாடு இல்லை.பிஎஸ்டி டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் வி2, ஸ்ட்ராண்ட்-டிஸ்ப்ளேஸ்மென்ட், ஐசோதெர்மல் ஆம்ப்ளிஃபிகேஷன் LAMP (லூப் மீடியடட் ஐசோதெர்மல் ஆம்ப்ளிஃபிகேஷன்) மற்றும் விரைவான வரிசைப்படுத்தலுக்கு மிகவும் பொருத்தமானது.
கூறுகள்
| கூறு | HC5005A-01 | HC5005A-02 | HC5005A-03 |
| BstDNAபாலிமரேஸ் V2(கிளிசரால் இல்லாதது)(8U/μL) | 0.2 மி.லி | 1 மி.லி | 10 மி.லி |
| 10×HC Bst V2 இடையக | 1.5 மி.லி | 2×1.5 மிலி | 3×10 மிலி |
| MgSO4(100மிமீ) | 1.5 மி.லி | 2×1.5 மிலி | 2×10 மிலி |
விண்ணப்பங்கள்
1.LAMP சமவெப்ப பெருக்கம்
2.டிஎன்ஏ இழை ஒற்றை இடப்பெயர்ச்சி எதிர்வினை
3.உயர் GC மரபணு வரிசைமுறை
4. நானோகிராம் மட்டத்தின் டிஎன்ஏ வரிசைமுறை.
சேமிப்பு நிலை
0°Cக்கு கீழ் போக்குவரத்து மற்றும் -25°C~-15°C இல் சேமிக்கப்படும்.
அலகு வரையறை
65 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 30 நிமிடங்களில் 25 nmol dNTP ஐ அமிலம் கரையாத பொருளில் இணைக்கும் நொதியின் அளவு ஒரு அலகு என வரையறுக்கப்படுகிறது.
தர கட்டுப்பாடு
1.புரதத் தூய்மை மதிப்பீடு (SDS-PAGE):Bst DNA பாலிமரேஸ் V2 இன் தூய்மையானது Coomassie Blue கண்டறிதலைப் பயன்படுத்தி SDS-PAGE பகுப்பாய்வு மூலம் ≥99% தீர்மானிக்கப்படுகிறது.
2.Exonuclease செயல்பாடு:1 μg λ -Hind Ⅲ டிஜெஸ்ட் டிஎன்ஏவை 16 மணிநேரத்திற்கு 37 ℃ இல் குறைந்தபட்சம் 8 U Bst DNA பாலிமரேஸ் V2 கொண்ட 50 μL வினையின் அடைகாத்தல் தீர்மானிக்கப்பட்டபடி கண்டறியக்கூடிய சிதைவை ஏற்படுத்தாது.
3.நிக்கேஸ் செயல்பாடு:குறைந்தபட்சம் 8 U Bst DNA பாலிமரேஸ் V2 உடன் 1 μg pBR322 DNA உடன் 37°C இல் 16 மணிநேரத்திற்கு 50 μL வினையின் அடைகாத்தல் தீர்மானிக்கப்பட்டபடி கண்டறியக்கூடிய சிதைவை ஏற்படுத்தாது.
4.RNase செயல்பாடு:குறைந்தபட்சம் 8 U Bst DNA பாலிமரேஸ் V2 உடன் 1.6 μg MS2 RNA உடன் 37°C இல் 16 மணிநேரத்திற்கு 50 μL வினையின் அடைகாத்தல் தீர்மானிக்கப்பட்டபடி கண்டறியக்கூடிய சிதைவை ஏற்படுத்தாது.
5.ஈ. கோலை டிஎன்ஏ:120 U இன் Bst DNA பாலிமரேஸ் V2, E. coli 16S rRNA லோக்கஸுக்குக் குறிப்பிட்ட ப்ரைமர்களுடன் TaqMan qPCR ஐப் பயன்படுத்தி E. coli மரபணு DNA இருப்பதைத் திரையிடுகிறது.E. coli மரபணு DNA மாசுபாடு ≤1 நகல் ஆகும்.
விளக்கு எதிர்வினை
| கூறுகள் | 25μL |
| 10×HC Bst V2 இடையக | 2.5 μL |
| MgSO4 (100மிமீ) | 1.5 μL |
| dNTPs (ஒவ்வொன்றும் 10mM) | 3.5 μL |
| SYTO™ 16 பச்சை (25×)a | 1.0 μL |
| ப்ரைமர் கலவைb | 6 μL |
| Bst DNA பாலிமரேஸ் V2 (கிளிசரால் இல்லாதது) (8 U/uL) | 1 μL |
| டெம்ப்ளேட் | × μL |
| ddH₂O | 25 μL வரை |
குறிப்புகள்:
1) a.SYTOTM 16 பச்சை (25×): சோதனைத் தேவைகளின்படி, மற்ற சாயங்களை மாற்றாகப் பயன்படுத்தலாம்;
2) பி.ப்ரைமர் கலவை: 20 µ M FIP, 20 µ M BIP, 2.5 µ M F3, 2.5 µ M B3, 5 µ M LF, 5 µ M LB மற்றும் பிற தொகுதிகளைக் கலப்பதன் மூலம் பெறப்பட்டது.
எதிர்வினை மற்றும் நிலை
1 × HC Bst V2 தாங்கல், அடைகாக்கும் வெப்பநிலை 60°C முதல் 65°C வரை இருக்கும்.
வெப்ப செயலிழப்பு
80 °C, 20 நிமிடங்கள்
