மல்டிபிளக்ஸ் ஒரு படி RT-qPCR பிரீமிக்ஸ்
விளக்கம்
பூனை எண்: HCR5141A
மல்டிபிளக்ஸ் ஒன் ஸ்டெப் RT-qPCR பிரீமிக்ஸ் என்பது டெம்ப்ளேட்டாக RNA ஐ அடிப்படையாகக் கொண்ட மல்டிபிளக்ஸ் அளவு PCR கிட் ஆகும்.பரிசோதனையில், ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் மற்றும் குவாண்டிடேட்டிவ் பிசிஆர் ஆகியவை ஒரே எதிர்வினைக் குழாயில் செய்யப்படுகின்றன, இது சோதனை செயல்பாட்டை எளிதாக்குகிறது மற்றும் மாசுபாட்டின் அபாயத்தைக் குறைக்கிறது.பஃபர் மற்றும் என்சைம் கலவையின் தனித்துவமான வடிவமைப்பு ஒரு-படி லியோபிலைஸ் செய்யப்பட்ட அமைப்பில் பயன்படுத்தப்படலாம்.அளவு பெருக்கத்திற்காக ஹாட்ஸ்டார்ட் டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸைப் பயன்படுத்தி முதல் ஸ்ட்ராண்ட் சிடிஎன்ஏவின் திறமையான தொகுப்புக்காக இந்த கிட் வெப்ப-எதிர்ப்பு தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸைப் பயன்படுத்துகிறது.இது உகந்த எதிர்வினை தாங்கல், என்சைம்கள் கலவை போன்றவற்றைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் குறிப்பிட்ட பிசிஆர் பெருக்கத்தை திறம்பட தடுக்கும் மற்றும் பல qPCR எதிர்வினைகளின் பெருக்க செயல்திறனை மேம்படுத்தும் காரணிகள் சேர்க்கப்பட்டன, ப்ரைமர்களின் பெருக்க செயல்திறனை உறுதி செய்யும் போது பல ஃப்ளோரசன் அளவு பெருக்கத்தை செயல்படுத்துகிறது.
கூறுகள்
| பெயர் |
| 1. லியோ-பஃபர் |
| 2. லியோ-என்சைம் கலவை |
| 3. லியோ பாதுகாப்பு |
போக்குவரத்து நிலைமைஅயனி
ப: லியோ-பஃபர் மற்றும் பாதுகாப்பு: -25~-15℃, அடுக்கு வாழ்க்கை 1 வருடம்.
பி: லியோ-என்சைம் கலவை, 2-8 ℃, அடுக்கு வாழ்க்கை 6 மாதங்கள்.
செயல்பாட்டிற்கான வழிமுறைகள்
1. எதிர்வினை அமைப்பு (உதாரணமாக 25μL ஐ எடுத்துக் கொள்ளுங்கள்)
| கூறுகள் | தொகுதி (μL) | இறுதி செறிவு |
| லியோ-பஃபர் | 6 | 1* |
| லியோ-என்சைம் கலவை | 1 | - |
| லியோ-பாதுகாப்பாளர் | 8 | - |
| ப்ரைமர் மிக்ஸ் (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| ஆய்வு கலவை (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| ஆர்என்ஏ டெம்ப்ளேட் | 5 | - |
| DEPC H2O | 25 வரை | - |
2. உகந்த சைக்கிள் ஓட்டுதல் நெறிமுறை
1) நிலையான சைக்கிள் ஓட்டுதல் நெறிமுறை
| எதிர்வினை நிலை | வெப்ப நிலை | நேரம் | மிதிவண்டி | |
| 1 | தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் | 50°Ca | 10நிமி | 1 |
| 2 | ஆரம்ப நிலைமாற்றம் | 95°C | 5 நிமிடம் | 1 |
| 3 | பெருக்க எதிர்வினை | 95°C | 15 வினாடிகள் | 45 சுழற்சிகள் |
| 60°Cb | 30 வினாடிகள்c |
2) வேகமான சைக்கிள் ஓட்டுதல் நெறிமுறை
|
| எதிர்வினை நிலை | வெப்ப நிலை | நேரம் | மிதிவண்டி |
| 1 | தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் | 50°Ca | 2 நிமிடம் | 1 |
| 2 | ஆரம்ப நிலைமாற்றம் | 95°C | 2 நொடி | 1 |
| 3 | பெருக்க எதிர்வினை | 95°C | 1 வினாடி |
45 சுழற்சிகள் |
| 60°Cb | 13 நொடிc |
குறிப்பு:
a) தலைகீழ் படியெடுத்தல்: வெப்பநிலை 10-15 நிமிடங்களுக்கு 42°C அல்லது 50°C ஐ தேர்ந்தெடுக்கலாம்.
b) பெருக்க எதிர்வினை: வடிவமைக்கப்பட்ட ப்ரைமர்களின் Tm மதிப்பின் படி வெப்பநிலை சரிசெய்யப்படுகிறது.
c)ஒளிரும் தன்மை சமிக்ஞை கையகப்படுத்தல்: தயவு செய்து சோதனை நடைமுறையை தேவைகளுக்கு ஏற்ப அமைக்கவும்கருவி கையேடு.
தொழில்நுட்ப தகவல்/விவரக்குறிப்புகள்
| சூடான தொடக்கம் | உள்ளமைக்கப்பட்ட சூடான தொடக்கம் |
| கண்டறியும் முறை | ப்ரைமர்-ஆய்வு கண்டறிதல் |
| PCR முறை | ஒரு படி RT-qPCR |
| மாதிரி வகை | ஆர்.என்.ஏ |
குறிப்புகள்
1. இந்த தயாரிப்பு ஆராய்ச்சி பயன்பாட்டிற்கு மட்டுமே.
2. உங்கள் உடல்நலம் மற்றும் பாதுகாப்பை உறுதிப்படுத்த, தேவையான PPE, அத்தகைய ஆய்வக கோட் மற்றும் கையுறைகளை அணியவும்!
