பாஸ்பேடேஸ் அல்கலைன் (ALP)
விளக்கம்
அல்கலைன் பாஸ்பேடேஸ் TAB5 மரபணுவைக் கொண்டு செல்லும் ஒரு மறுசீரமைப்பு E. coli விகாரத்திலிருந்து பெறப்பட்டது.என்சைம் டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏ பாஸ்போமோனோஸ்டர்களின் 5´ மற்றும் 3´ முனைகளின் டிஃபோஸ்ஃபோரிலேஷனை ஊக்குவிக்கிறது.மேலும், இது ரைபோஸ் மற்றும் டிஆக்சிரைபோநியூக்ளியோசைட் ட்ரைபாஸ்பேட்டுகளை (NTPs மற்றும் dNTPs) ஹைட்ரோலைஸ் செய்கிறது.TAB5 அல்கலைன் பாஸ்பேடேஸ் 5´ துருத்திக்கொண்டிருக்கும், 5´ இடைப்பட்ட மற்றும் மழுங்கிய முனைகளில் செயல்படுகிறது.டிஎன்ஏ அல்லது ஆர்என்ஏவின் பாஸ்போரிலேட்டட் முனைகளை அகற்ற குளோனிங் அல்லது ப்ரோப் எண்ட் லேபிளிங் போன்ற பல மூலக்கூறு உயிரியல் பயன்பாடுகளில் பாஸ்பேடேஸைப் பயன்படுத்தலாம்.குளோனிங் சோதனைகளில், டிஃபோஸ்ஃபோரிலேஷன் லீனியர்ஸ் பிளாஸ்மிட் டிஎன்ஏவை சுய-பிணைப்பில் இருந்து தடுக்கிறது.டிஎன்ஏ வரிசைப்படுத்துதலுக்கான டெம்ப்ளேட்டைத் தயாரிப்பதற்காக இது PCR எதிர்வினைகளில் இணைக்கப்படாத dNTP களை சிதைக்கலாம்.5 நிமிடங்களுக்கு 70 டிகிரி செல்சியஸில் சூடுபடுத்துவதன் மூலம் நொதி முழுமையாகவும் மீளமுடியாமல் செயலிழக்கச் செய்யப்படுகிறது.
பயன்பாடு
1.ஆல்கலைன் பாஸ்பேடேஸுடன் இணைந்த புரதங்கள் (ஆன்டிபாடிகள், ஸ்ட்ரெப்டாவிடின் போன்றவை) இலக்கு மூலக்கூறுகளை குறிப்பாக அடையாளம் காண முடியும், மேலும் ELISA, WB மற்றும் ஹிஸ்டோகெமிக்கல் கண்டறிதலில் பயன்படுத்தலாம்;
2. டிஎன்ஏ அல்லது ஆர்என்ஏவின் 5 '-டெர்மினலை டிஃபோஸ்ஃபோரைஸ் செய்ய அல்கலைன் பாஸ்பேடேஸைப் பயன்படுத்தலாம்.
3.மேலே உள்ள டிஃபோஸ்ஃபோரிலேட்டட் டிஎன்ஏ அல்லது ஆர்என்ஏவை ரேடியோ-லேபிளிடப்பட்ட பாஸ்பேட்டுகளால் (T4 பாலி-நியூக்ளியோடைடு கைனேஸ் வழியாக) லேபிளிடலாம்.
இரசாயன அமைப்பு
விவரக்குறிப்பு
சோதனை பொருட்கள் | விவரக்குறிப்புகள் |
என்சைம் செயல்பாடு | 5U/μL |
எண்டோநியூக்லீஸ் செயல்பாடு | கண்டுபிடிக்க படவில்லை |
Exonuuclease செயல்பாடு | கண்டுபிடிக்க படவில்லை |
நிக்கிங் செயல்பாடு | கண்டுபிடிக்க படவில்லை |
RNase செயல்பாடு | கண்டுபிடிக்க படவில்லை |
ஈ.கோலி டிஎன்ஏ | ≤1நகல்/5U |
எண்டோடாக்சின் | LAL-டெஸ்ட், ≤10EU/mg |
தூய்மை | ≥95% |
போக்குவரத்து மற்றும் சேமிப்பு
போக்குவரத்து:சுற்றுப்புறம்
சேமிப்பு:2-8 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் சேமிக்கவும்
மீண்டும் சோதனை பரிந்துரைக்கப்படுகிறதுவாழ்க்கை:2 வருடம்