மல்டிபிளக்ஸ் qPCR ஆய்வு பிரீமிக்ஸ்
பூனை எண்: HCB5051A
TaqMan மல்டிபிளக்ஸ் qPCR மாஸ்டர் மிக்ஸ் (சாய அடிப்படையிலானது) என்பது 2 × நிகழ்நேர அளவு PCR பெருக்கத்திற்கான முன்-தீர்வாகும், இது அதிக உணர்திறன் மற்றும் தனித்தன்மையால் வகைப்படுத்தப்படுகிறது, இது நீல நிறத்தில் உள்ளது, மேலும் இது மாதிரி சேர்ப்பின் விளைவையும் கொண்டுள்ளது.இந்த தயாரிப்பு ஒரு 2× கலவை முன்-கலப்பு வினைப்பொருளாகும், இது ஒரு வினையில் நான்கு ஃப்ளோரசன்ட் அளவு PCR எதிர்வினைகளை செயல்படுத்துகிறது.இந்த தயாரிப்பு மரபணு மாற்றப்பட்ட ஆன்டிபாடி முறையை ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைம் கொண்டுள்ளது, இது பெருக்க உணர்திறன் மற்றும் தனித்துவத்தை பெரிதும் மேம்படுத்துகிறது.அதே நேரத்தில், இந்த தயாரிப்பு பல-எதிர்வினை இடையகத்தை ஆழமாக மேம்படுத்தியுள்ளது, இது எதிர்வினையின் பெருக்க செயல்திறனை மேம்படுத்துகிறது மற்றும் குறைந்த செறிவு வார்ப்புருக்களின் பயனுள்ள பெருக்கத்தை ஊக்குவிக்கும்.இந்த தயாரிப்பு மரபணு வகை மற்றும் மல்டிபிளக்ஸ் அளவு பகுப்பாய்வுக்கு பயன்படுத்தப்படலாம்.
விவரக்குறிப்பு
| சூடான தொடக்கம் | உள்ளமைக்கப்பட்ட சூடான தொடக்கம் |
| கண்டறியும் முறை | ப்ரைமர்-ஆய்வு கண்டறிதல் |
| PCR முறை | qPCR |
| பாலிமரேஸ் | Taq DNA பாலிமரேஸ் |
| மாதிரி வகை | டிஎன்ஏ |
களஞ்சிய நிலைமை
தயாரிப்பு உலர்ந்த பனியுடன் அனுப்பப்படுகிறது மற்றும் 2 வருடத்திற்கு -25~-15℃ இல் சேமிக்கப்படும்.
வழிமுறைகள்
1. எதிர்வினைஅமைப்பு
| கூறுகள் | தொகுதி (μL) | இறுதி செறிவு |
| 2× TaqMan மல்டிபிளக்ஸ் qPCR மாஸ்டர் மிக்ஸ் | 12.5 | 1× |
| ப்ரைமர் கலவை (10 μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| ஆய்வு கலவை (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| ரோக்ஸ் குறிப்பு சாயம் | 0.5 | 1× |
| டிஎன்ஏ/சிடிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட் | 1-10 | - |
| ddH2O | 25 வரை | - |
குறிப்புகள்:கடுமையான குலுக்கல்களிலிருந்து அதிகப்படியான குமிழ்களைத் தவிர்க்க, பயன்படுத்துவதற்கு முன் நன்கு கலக்கவும்.
அ.ப்ரைமர் செறிவு: ப்ரைமர் மிக்ஸில் பல ஜோடி ப்ரைமர்கள் உள்ளன, பொதுவாக ஒவ்வொரு ப்ரைமரும் இறுதி செறிவு 0.2 μmol/L இருக்கும், மேலும் 0.1 மற்றும் 0.5 μmol/L க்கு இடையில் பொருத்தமானதாக சரிசெய்யப்படலாம்.
பி.ஆய்வு செறிவு: ஆய்வு கலவையானது பல்வேறு ஒளிரும் சமிக்ஞைகளுடன் கூடிய பல ஆய்வுகளைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் ஒவ்வொரு ஆய்வின் செறிவையும் குறிப்பிட்ட சூழ்நிலைக்கு ஏற்ப 50 முதல் 250 nmol/L வரை சரிசெய்யலாம்.
1.ராக்ஸ் சாயம் குறிப்பு: கிணறுகளுக்கு இடையே உருவாக்கப்படும் ஒளிரும் சமிக்ஞையின் பிழையை சரிசெய்வதற்காக, அப்ளைடு பயோசிஸ்டம்ஸ் போன்ற ரியல் டைம் பிசிஆர் பெருக்க கருவியில் இது பயன்படுத்தப்படுகிறது;இந்த தயாரிப்பில் ரோக்ஸ் சாய குறிப்பு இல்லை.தேவைப்பட்டால் Cas#10200 பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.
2.டெம்ப்ளேட் நீர்த்துப்போதல்: qPCR மிகவும் உணர்திறன் கொண்டது, மேலும் வார்ப்புருவை பயன்பாட்டிற்கு நீர்த்துப்போகச் செய்ய பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.டெம்ப்ளேட் ஒரு சிடிஎன்ஏ ஸ்டாக் தீர்வாக இருந்தால், டெம்ப்ளேட் தொகுதி மொத்த அளவின் 1/10 ஐ விட அதிகமாக இருக்கக்கூடாது.
3.எதிர்வினை அமைப்பு: 25μL, 30μL அல்லது 50 μL இலக்கு மரபணு பெருக்கத்தின் செயல்திறன் மற்றும் மீண்டும் மீண்டும் செய்ய பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.
4.சிஸ்டம் தயாரித்தல்: சூப்பர் க்ளீன் பெஞ்சில் தயார் செய்து, டிப்ஸ் மற்றும் ரியாக்ஷன் டியூப்களை நியூக்லீஸ் எச்சம் இல்லாமல் பயன்படுத்தவும்;வடிகட்டி தோட்டாக்களுடன் குறிப்புகளைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.குறுக்கு மாசுபாடு மற்றும் ஏரோசல் மாசுபாட்டைத் தவிர்க்கவும்.
2.எதிர்வினை திட்டம்
| சுழற்சி படி | வெப்பநிலை. | நேரம் | சுழற்சிகள் |
| ஆரம்பம்-மறுத்தல் | 95℃ | 5 நிமிடங்கள் | 1 |
| டினாடரேஷன் | 95℃ | 15 வினாடிகள் | 45 |
| அனீலிங்/நீட்டிப்பு | 60℃ | 30 வினாடிகள் |
குறிப்புகள்:
1.அனீலிங்/நீட்டிப்பு: வடிவமைக்கப்பட்ட ப்ரைமர் டிஎம் மதிப்பின்படி வெப்பநிலை மற்றும் நேரத்தை சரியான முறையில் சரிசெய்யலாம்.
2.ஃப்ளோரசன்ஸ் சிக்னல் கையகப்படுத்தல்: வெவ்வேறு qPCR கண்டறிதல் கருவிகளுக்கு தேவையான ஃப்ளோரசன் சிக்னல் கையகப்படுத்தல் நேரம் வேறுபட்டது, குறைந்தபட்ச நேர வரம்புக்கு ஏற்ப அமைக்கவும்.பல பொதுவான கருவிகளின் நேரம் பின்வருமாறு அமைக்கப்பட்டுள்ளது:
20 நொடி: பயன்பாட்டு உயிரியமைப்புகள் 7700, 7900HT, 7500 வேகமாக
31 நொடி: அப்ளைடு பயோசிஸ்டம்ஸ் 7300
32 நொடி: அப்ளைடு பயோசிஸ்டம்ஸ் 7500
குறிப்புகள்
உங்கள் உடல்நலம் மற்றும் பாதுகாப்பை உறுதிப்படுத்த, தேவையான PPE, அத்தகைய ஆய்வக கோட் மற்றும் கையுறைகளை அணியுங்கள்!
