வைரல் டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுத்தல் கிட்
நாசோபார்னீஜியல் ஸ்வாப்ஸ், சுற்றுச்சூழல் ஸ்வாப்ஸ், செல் கல்ச்சர் சூப்பர்நேட்டண்டுகள் மற்றும் திசு ஹோமோஜெனேட் சூப்பர்நேட்டண்டுகள் போன்ற மாதிரிகளிலிருந்து உயர்-தூய்மை வைரஸ் டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவை விரைவாகப் பிரித்தெடுப்பதற்கு இந்தக் கருவி பொருத்தமானது.இந்த கிட் சிலிக்கா சவ்வு சுத்திகரிப்பு தொழில்நுட்பத்தை அடிப்படையாகக் கொண்டது, இது பீனால்/குளோரோஃபார்ம் ஆர்கானிக் கரைப்பான்கள் அல்லது உயர்தர வைரல் டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவை பிரித்தெடுக்க அதிக நேரம் எடுக்கும் ஆல்கஹால் மழைப்பொழிவு ஆகியவற்றின் தேவையை நீக்குகிறது.பெறப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலங்கள் அசுத்தங்கள் இல்லாதவை மற்றும் தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன், PCR, RT-PCR, நிகழ்நேர PCR, அடுத்த தலைமுறை வரிசைமுறை (NGS) மற்றும் நார்தர்ன் ப்ளாட் போன்ற கீழ்நிலை சோதனைகளில் பயன்படுத்த தயாராக உள்ளன.
களஞ்சிய நிலைமை
15 ~ 25℃ இல் சேமித்து, அறை வெப்பநிலையில் கொண்டு செல்லவும்
கூறுகள்
| கூறுகள் | 100RXNS |
| பஃபர் வி.எல் | 50 மி.லி |
| தாங்கல் RW | 120 மி.லி |
| RNase-இலவச ddH2 O | 6 மி.லி |
| FastPure RNA நெடுவரிசைகள் | 100 |
| சேகரிப்பு குழாய்கள் (2மிலி) | 100 |
| RNase இல்லாத சேகரிப்பு குழாய்கள் (1 .5ml) | 100 |
இடையக VL:சிதைவு மற்றும் பிணைப்புக்கான சூழலை வழங்கவும்.
Buffer RW:மீதமுள்ள புரதங்கள் மற்றும் பிற அசுத்தங்களை அகற்றவும்.
RNase-இலவச ddH2O:சுழல் நெடுவரிசையில் உள்ள மென்படலத்திலிருந்து டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவை எலுட் செய்யவும்.
FastPure RNA நெடுவரிசைகள்:குறிப்பாக டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவை உறிஞ்சும்.
சேகரிப்பு குழாய்கள் 2 மில்லி:வடிகட்டி சேகரிக்கவும்.
RNase-இலவச சேகரிப்பு குழாய்கள் 1.5 மில்லி:டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவை சேகரிக்கவும்.
விண்ணப்பங்கள்
நாசோபார்னீஜியல் ஸ்வாப்ஸ், சுற்றுச்சூழல் ஸ்வாப்ஸ், செல் கல்ச்சர் சூப்பர்நேட்டண்டுகள் மற்றும் திசு ஒரே மாதிரியான சூப்பர்நேட்டண்டுகள்.
சுயமாக தயாரிக்கப்பட்ட பொருள்ials
RNase-இலவச குழாய் குறிப்புகள், 1.5 மில்லி RNase-இலவச மையவிலக்கு குழாய்கள், மையவிலக்கு, சுழல் கலவை மற்றும் குழாய்கள்.
பரிசோதனை செயல்முறை
உயிர் பாதுகாப்பு அமைச்சரவையில் பின்வரும் அனைத்து படிகளையும் செய்யவும்.
1. RNase-இல்லாத மையவிலக்குக் குழாயில் 200 μl மாதிரியைச் சேர்க்கவும் (PBS அல்லது 0.9% NaCl போதுமான மாதிரி இல்லாத பட்சத்தில்), 500 μl Buffer VL ஐச் சேர்த்து, 15 - 30 வினாடிகள் மற்றும் மையவிலக்கு சுழல் மூலம் நன்கு கலக்கவும். குழாயின் அடிப்பகுதியில் கலவையை சேகரிக்க சுருக்கமாக.
2. ஒரு சேகரிப்பு குழாய்களில் FastPure RNA நெடுவரிசைகளை 2 மி.லி.கலவையை படி 1 இலிருந்து FastPure RNA நெடுவரிசைகளுக்கு மாற்றி, 1 நிமிடத்திற்கு 12,000 rpm (13,400 × g) இல் மையவிலக்கு செய்து, வடிகட்டியை நிராகரிக்கவும்.
3. FastPure RNA நெடுவரிசைகளில் 600 μl Buffer RW ஐச் சேர்த்து, 30 நொடிகளுக்கு 12,000 rpm (13,400 × g) இல் மையவிலக்கு, மற்றும் வடிகட்டியை நிராகரிக்கவும்.
4. படி 3 ஐ மீண்டும் செய்யவும்.
5. காலியான நெடுவரிசையை 12,000 ஆர்பிஎம்மில் (13,400 × கிராம்) 2 நிமிடங்களுக்கு மையவிலக்கு செய்யவும்.
6. FastPure RNA நெடுவரிசைகளை ஒரு புதிய RNase-இலவச சேகரிப்பு குழாய்களுக்கு 1.5 மில்லி (கிட்டில் வழங்கப்பட்டுள்ளது) கவனமாக மாற்றவும், மேலும் 30 - 50 μl RNase-free ddH2O ஐ நெடுவரிசையைத் தொடாமல் சவ்வின் மையத்தில் சேர்க்கவும்.அறை வெப்பநிலையில் 1 நிமிடம் நிற்க அனுமதிக்கவும் மற்றும் 1 நிமிடத்திற்கு 12,000 rpm (13,400 × g) இல் மையவிலக்கு.
7. FastPure RNA நெடுவரிசைகளை நிராகரிக்கவும்.டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவை அடுத்தடுத்த மதிப்பீடுகளுக்கு நேரடியாகப் பயன்படுத்தலாம் அல்லது குறுகிய காலத்திற்கு -30~ -15°C அல்லது நீண்ட காலத்திற்கு -85 ~-65°C இல் சேமிக்கப்படும்.
குறிப்புகள்
ஆராய்ச்சி பயன்பாட்டிற்கு மட்டுமே.நோயறிதல் நடைமுறைகளில் பயன்படுத்தப்படவில்லை.
1. முன்கூட்டியே அறை வெப்பநிலையில் மாதிரிகளை சமன் செய்யவும்.
2. வைரஸ்கள் அதிக அளவில் தொற்றும் தன்மை கொண்டவை.பரிசோதனைக்கு முன் தேவையான அனைத்து பாதுகாப்பு முன்னெச்சரிக்கை நடவடிக்கைகளும் எடுக்கப்பட்டுள்ளதா என்பதை உறுதிப்படுத்தவும்.
3. மீண்டும் மீண்டும் உறைதல் மற்றும் மாதிரியை கரைப்பதைத் தவிர்க்கவும், ஏனெனில் இது பிரித்தெடுக்கப்பட்ட வைரஸ் டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவின் சிதைவு அல்லது விளைச்சலைக் குறைக்கலாம்.
4. சுய-தயாரிக்கப்பட்ட உபகரணங்களில் RNase-இலவச குழாய் குறிப்புகள், 1.5 மில்லி RNase-இலவச மையவிலக்கு குழாய்கள், மையவிலக்கு, சுழல் கலவை மற்றும் குழாய்கள் ஆகியவை அடங்கும்.
5. கிட்டைப் பயன்படுத்தும் போது, லேப் கோட், செலவழிப்பு லேடெக்ஸ் கையுறைகள் மற்றும் ஒரு டிஸ்போசபிள் மாஸ்க் ஆகியவற்றை அணிந்து, RNase மாசுபாட்டின் அபாயத்தைக் குறைக்க RNase இல்லாத நுகர்பொருட்களைப் பயன்படுத்தவும்.
6. குறிப்பிடப்படாவிட்டால் அறை வெப்பநிலையில் அனைத்து படிகளையும் செய்யவும்.
பொறிமுறை மற்றும் பணிப்பாய்வு
