2×PCR மாஸ்டர் மிக்ஸ் (சாயம் இல்லாமல்)
PCR மாஸ்டர் மிக்ஸ் என்பது, Taq DNA பாலிமரேஸ், dNTP கலவை MgCl2 மற்றும் உகந்த பஃபர் உட்பட, பயன்படுத்தத் தயாராக இருக்கும் ஒரு வகையான வழக்கமான PCR ப்ரீமிக்ஸ்டு தீர்வு.எதிர்வினையின் போது, ப்ரைமர் மற்றும் டெம்ப்ளேட்டை மட்டுமே பெருக்கத்திற்காக சேர்க்க முடியும், இது பரிசோதனையின் செயல்பாட்டு படிகளை பெரிதும் எளிதாக்குகிறது.இந்த தயாரிப்பு சிறந்த நிலைப்படுத்திகளைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் 4℃ இல் 3 மாதங்களுக்கு சேமிக்கப்படும்.PCR தயாரிப்பு 3′-dA ப்ரோட்ரூஷனைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் T வெக்டரில் எளிதாக குளோன் செய்ய முடியும்.
களஞ்சிய நிலைமை
தயாரிப்பு இரண்டு ஆண்டுகளுக்கு -25℃~ -15℃ இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்.
விவரக்குறிப்புகள்
| நம்பகத்தன்மை (vs.Taq) | 1× |
| சூடான தொடக்கம் | No |
| ஓவர்ஹாங் | 3′-A |
| பாலிமரேஸ் | Taq DNA பாலிமரேஸ் |
| எதிர்வினை வடிவம் | சூப்பர்மிக்ஸ் அல்லது மாஸ்டர் மிக்ஸ் |
| எதிர்வினை வேகம் | தரநிலை |
| உற்பத்தி பொருள் வகை | PCR மாஸ்டர் மிக்ஸ் (2×) |
வழிமுறைகள்
1.எதிர்வினை அமைப்பு
| கூறுகள் | அளவு (μL) |
| டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏ | பொருத்தமானது |
| ப்ரைமர் 1 (10 μmol/L) | 2 |
| ப்ரைமர் 2 (10 μmol/L) | 2 |
| பிசிஆர் மாஸ்டர் மிக்ஸ் | 25 |
| ddH2O | 50 வரை |
2.பெருக்க நெறிமுறை
| சுழற்சி படிகள் | வெப்பநிலை (°C) | நேரம் | சுழற்சிகள் |
| முன் குறைதல் | 94℃ | 5 நிமிடங்கள் | 1 |
| டினாடரேஷன் | 94℃ | 30 நொடி | 35 |
| அனீலிங் | 50-60 ℃ | 30 நொடி | |
| நீட்டிப்பு | 72℃ | 30-60 நொடி/கி.பி | |
| இறுதி நீட்டிப்பு | 72℃ | 10 நிமிடங்கள் | 1 |
குறிப்புகள்:
1) டெம்ப்ளேட் பயன்பாடு: 50-200 ng மரபணு DNA;0.1- 10 ng பிளாஸ்மிட் டிஎன்ஏ.
2) எம்.ஜி2+செறிவு: இந்த தயாரிப்பில் பெரும்பாலான PCR எதிர்வினைகளுக்கு ஏற்ற MgCl2 3 mM உள்ளது.
3) அனீலிங் வெப்பநிலை: ப்ரைமர்களின் கோட்பாட்டு Tm மதிப்பைப் பார்க்கவும்.ப்ரைமரின் கோட்பாட்டு மதிப்பை விட அனீலிங் வெப்பநிலை 2-5 ℃ குறைவாக அமைக்கப்படலாம்.
4) நீட்டிப்பு நேரம்: மூலக்கூறு அடையாளம் காண, 30 நொடி/kb பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.மரபணு குளோனிங்கிற்கு, 60நொடி/கேபி பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.
குறிப்புகள்
1.உங்கள் பாதுகாப்பு மற்றும் ஆரோக்கியத்திற்காக, ஆய்வக கோட்டுகள் மற்றும் செயல்பாட்டிற்கு செலவழிக்கும் கையுறைகளை அணியவும்.
2.ஆராய்ச்சி பயன்பாட்டிற்கு மட்டுமே!
