2×HiF Taq பிளஸ் மாஸ்டர் மிக்ஸ்
பூனை எண்: HCR2014B
எச்ஐஎஃப் டாக் பிளஸ் மாஸ்டர் மிக்ஸ் (சாயத்துடன்) என்பது பிளஸ் எச்ஐஎஃப் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ், டிஎன்டிபிகள் மற்றும் உகந்த பஃபர் ஆகியவற்றைக் கொண்ட 2×பிரிமிக்ஸ்டு தீர்வு.அறை வெப்பநிலையில் பாலிமரேஸ் செயல்பாட்டைத் தடுக்கும் இரண்டு மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகள் மற்றும் 3′→5′எக்ஸோநியூக்லீஸ் செயல்பாடு ஆகியவை எளிதாகவும் மிகவும் குறிப்பிட்ட ஹாட் ஸ்டார்ட் பிசிஆர் மாஸ்டர் கலவையில் சேர்க்கப்படுகின்றன.என்சைமுக்கு நீண்ட துண்டுப் பெருக்கத் திறனை வழங்க, நீட்டிப்பு காரணி மாஸ்டர் கலவையில் சேர்க்கப்படுகிறது, பெருக்கத்தின் நீளம் 13 kb வரை இருக்கலாம், நொதி 5′→3′ DNA பாலிமரேஸ் செயல்பாடு மற்றும் 3′→5′ exonuclease செயல்பாடு, அதன் நம்பகத்தன்மை Taq DNA பாலிமரேஸை விட 83 மடங்கு ஆகும், இது சாதாரண DNA பாலிமரேஸை விட 9 மடங்கு அதிகம்.இது சிக்கலான வார்ப்புருக்களின் பெருக்கத்திற்கு ஏற்றது, பெருக்க தயாரிப்பு ஒரு அப்பட்டமான முடிவாகும்.
2×HIF Taq பிளஸ் மாஸ்டர் மிக்ஸ் (சாயத்துடன்) வேகமான மற்றும் எளிதான, அதிக உணர்திறன், வலுவான விவரக்குறிப்பு, நல்ல நிலைத்தன்மை போன்ற நன்மைகளைக் கொண்டுள்ளது, எதிர்வினை அமைப்பு ப்ரைமர்கள் மற்றும் டெம்ப்ளேட்களை மட்டுமே சேர்க்க வேண்டும், மேலும் இரண்டு-ஆல் பெருக்க முடியும். படி நெறிமுறை, சோதனை நடவடிக்கைகளை எளிதாக்குதல் மற்றும் நேரத்தை மிச்சப்படுத்துதல்.இந்தத் தயாரிப்பில் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் காட்டி சாயங்கள் உள்ளன, மேலும் PCR தயாரிப்புகளை எலக்ட்ரோபோரேசிஸுக்கு நேரடியாகப் பயன்படுத்தலாம்.கூடுதலாக, தயாரிப்பு ஒரு குறிப்பிட்ட பாதுகாப்பு முகவரைக் கொண்டுள்ளது, இதனால் மாஸ்டர் கலவை மீண்டும் மீண்டும் உறைந்த பிறகு நிலையான செயல்பாட்டை பராமரிக்க முடியும்.
களஞ்சிய நிலைமை
தயாரிப்புகள் 1 வருடத்திற்கு -25~-15℃ இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்.
விவரக்குறிப்புகள்
தயாரிப்பு விவரக்குறிப்பு | மாஸ்டர் மிக்ஸ் |
செறிவு | 2× |
சூடான தொடக்கம் | உள்ளமைக்கப்பட்ட ஹாட் ஸ்டார்ட் |
ஓவர்ஹாங் | மழுங்கிய |
எதிர்வினை வேகம் | விரைவு |
அளவு (இறுதி தயாரிப்பு) | 13kb வரை |
போக்குவரத்துக்கான நிபந்தனைகள் | உலர் பனி |
உற்பத்தி பொருள் வகை | உயர் நம்பக PCR ப்ரீமிக்ஸ்கள் |
வழிமுறைகள்
1.PCR எதிர்வினை அமைப்பு
கூறுகள் | தொகுதி (μL) |
டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட் | பொருத்தமானது |
முன்னோக்கி ப்ரைமர் (10 μmol/L) | 2.5 |
ரிவர்ஸ் ப்ரைமர் (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF Taq பிளஸ் மாஸ்டர் மிக்ஸ் | 25 |
ddH2O | 50 வரை |
2.வெவ்வேறு வார்ப்புருக்களின் பரிந்துரைக்கப்பட்ட பயன்பாடு
டெம்ப்ளேட் வகை | துண்டுகளை 1kb முதல் 10 kb வரை பெருக்கவும் |
மரபணு DNA | 50ng-200 ng |
பிளாஸ்மிட் அல்லது வைரல் டிஎன்ஏ | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (இறுதி PCR எதிர்வினை அளவின் 10% ஐ விட அதிகமாக இல்லை) |
3.பெருக்க நெறிமுறை
1) இரண்டு-படி புரோட்டோகால் (சிக்கலான டெம்ப்ளேட்)
சுழற்சி படி | வெப்பநிலை | நேரம் | சுழற்சிகள் |
ஆரம்ப நிலைமாற்றம் | 98℃ | 3 நிமிடம் | 1 |
டினாடரேஷன் | 98℃ | 10 வினாடிகள் | 30-35 |
நீட்டிப்பு | 68℃ | 30 நொடி/கி.பி | |
இறுதி நீட்டிப்பு | 72℃ | 5 நிமிடம் | 1 |
2) மூன்று-படி புரோட்டோகால் (வழக்கமான நெறிமுறை)
சுழற்சி படி | வெப்பநிலை | நேரம் | சுழற்சிகள் |
ஆரம்ப நிலைமாற்றம் | 98℃ | 3 நிமிடம் | 1 |
டினாடரேஷன் | 98℃ | 10 வினாடிகள் | 30-35 |
அனீலிங் | 60℃ | 20 நொடி | |
நீட்டிப்பு | 72℃ | 30 நொடி/கி.பி | |
இறுதி நீட்டிப்பு | 72℃ | 5 நிமிடம் | 1 |
3) அனீலிங் கிரேடியண்ட் புரோட்டோகால் (சிக்கலான டெம்ப்ளேட்)
சுழற்சி படி | வெப்ப நிலை | நேரம் | சுழற்சிகள் |
ஆரம்ப நிலைமாற்றம் | 98℃ | 3 நிமிடம் | 1 |
டினாடரேஷன் | 98℃ | 10 நொடி | 15 (ஒரு சுழற்சிக்கு 1℃ குறைப்பு) |
சாய்வு அனீலிங் | 70-55℃ | 20 நொடி | |
நீட்டிப்பு | 72℃ | 30 நொடி/கி.பி | |
டினாடரேஷன் | 98℃ | 10 நொடி |
20 |
அனீலிங் | 55℃ | 20 நொடி | |
நீட்டிப்பு | 72℃ | 30 நொடி/கி.பி | |
இறுதி நீட்டிப்பு | 72℃ | 5 நிமிடம் | 1 |
வெவ்வேறு பெருக்க நெறிமுறையின் கீழ் அம்சங்கள்
நெறிமுறைl | இரண்டு-படி | மூன்று-படி | சாய்வு அனீலிங் |
விவரக்குறிப்பு | வேகமாக | நடுத்தர | மெதுவாக |
குறிப்பிட்ட | உயர் | நடுத்தர | உயர் |
PCR மகசூல் | நடுத்தர | உயர் | நடுத்தர |
கண்டறிதல் விகிதம் | உயர் | நடுத்தர | உயர் |
குறிப்புகள்
உங்கள் உடல்நலம் மற்றும் பாதுகாப்பை உறுதிப்படுத்த, தேவையான PPE, அத்தகைய ஆய்வக கோட் மற்றும் கையுறைகளை அணியுங்கள்!