அல்ட்ரா நியூக்லீஸ் ஜிஎம்பி-கிரேடு
பூனை எண்: HC2016A
அல்ட்ராநியூக்லீஸ் ஜிஎம்பி-கிரேடு, எஸ்கெரிச்சியா கோலியில் (ஈ.கோலி) மரபணு ரீதியாக வடிவமைக்கப்பட்டு, ஜிஎம்பி சூழல்களின் கீழ் தயாரிக்கப்பட்டதன் மூலம் வெளிப்படுத்தப்பட்டு சுத்திகரிக்கப்படுகிறது.இது விஞ்ஞான ஆராய்ச்சியில் செல் சூப்பர்நேட்டன்ட் மற்றும் செல் லைசேட்டின் பாகுத்தன்மையைக் குறைக்கலாம், புரதச் சுத்திகரிப்புத் திறனை அதிகரிக்கலாம் மற்றும் புரதச் செயல்பாட்டு ஆராய்ச்சியை மேம்படுத்தலாம்.வைரஸ் சுத்திகரிப்பு, தடுப்பூசி உற்பத்தி, மற்றும் புரதம்/பாலிசாக்கரைடு மருந்து உற்பத்தி உள்ளிட்ட பயன்பாடுகளின் உயிரியல் தயாரிப்புகளின் செயல்திறன் மற்றும் பாதுகாப்பை மேம்படுத்தும், ஹோஸ்ட் நியூக்ளிக் அமில எச்சங்களை pg-தரத்திற்கு குறைக்கலாம்.தவிர, செல் சிகிச்சை மற்றும் தடுப்பூசி மேம்பாட்டில் மனித புற இரத்த மோனோநியூக்ளியர் செல்கள் (பிபிஎம்சி) கட்டிகளை தடுக்கவும் தயாரிப்பு பயன்படுத்தப்படலாம்.
UltraNuclease ஒரு நிறமற்ற, வெளிப்படையான திரவத்தின் தோற்றத்துடன், ஒரு ஸ்டெரிலைஸ் செய்யப்பட்ட மறுஉருவாக்கம் வடிவில் வழங்கப்படுகிறது, இது தாங்கலில் (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% கிளிசரின்) நீக்கப்பட்டது.இந்த தயாரிப்பு GMP செயல்முறை தேவைகளால் தயாரிக்கப்பட்டு திரவ வடிவில் வழங்கப்படுகிறது.
கூறுகள்
அல்ட்ராநியூக்லீஸ் GMP-தரம் (250 U/μL)
களஞ்சிய நிலைமை
தயாரிப்பு உலர்ந்த பனியுடன் அனுப்பப்படுகிறது மற்றும் இரண்டு ஆண்டுகளுக்கு -25℃~-15°C இல் சேமிக்கப்படும்.
தயாரிப்பு திறக்கப்பட்டு ஒரு வாரத்திற்கும் மேலாக 4℃ இல் சேமிக்கப்பட்டிருந்தால், வடிகட்ட பரிந்துரைக்கிறோம்நுண்ணுயிர் மாசுபடுவதைத் தடுக்கும் தயாரிப்பு.
விவரக்குறிப்புகள்
| எக்ஸ்பிரஷன் ஹோஸ்ட் | அல்ட்ரா நியூக்லீஸ் மரபணுவுடன் மறுசீரமைப்பு ஈ.கோலை |
| மூலக்கூறு எடை | 26.5 kDa |
| மின் புள்ளி | 6.85 |
| தூய்மை | ≥99% (SDS-பக்கம்) |
| சேமிப்பு தாங்கல் | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% கிளிசரின் |
|
அலகு வரையறை | ஒரு செயல்பாட்டு அலகு (U) இன் வரையறை என்பது பயன்படுத்தப்படும் நொதியின் அளவுΔA260 இன் உறிஞ்சுதல் மதிப்பை 30 நிமிடங்களில் 1.0 ஆல் 2. 625 மி.லி.8.0 pH உடன் 37℃ இல் எதிர்வினை அமைப்பு (முழுமையான செரிமானத்திற்கு சமம்37 μg சால்மன் விந்து டிஎன்ஏ ஒலிகோநியூக்ளியோடைடுகளாக) |
வழிமுறைகள்
1. மாதிரி சேகரிப்பு
ஒட்டிய செல்கள்: ஊடகத்தை அகற்றவும், பிபிஎஸ் மூலம் செல்களைக் கழுவவும், மற்றும் சூப்பர்நேட்டன்ட்டை அகற்றவும்.
சஸ்பென்ஷன் செல்கள்: செல்களை மையவிலக்கு மூலம் சேகரிக்கவும், செல்களை பிபிஎஸ் மூலம் கழுவவும், மையவிலக்கு 6,00010 நிமிடங்களுக்கு rpm, துகள்களை சேகரிக்கவும்.
Escherichia coli: மையவிலக்கு மூலம் பாக்டீரியாவை சேகரிக்கவும், PBS மூலம் ஒருமுறை கழுவவும், 8,000 இல் மையவிலக்கு5 நிமிடம் rpm, மற்றும் பெல்லட்டை சேகரிக்கவும்.
2. மாதிரி சிகிச்சை
சேகரிக்கப்பட்ட செல் துகள்களை லிசிஸ் பஃப்பருடன் நிறை(g) வால்யூம்(mL)1:(10-20) என்ற விகிதத்தில் கையாளவும், அல்லது இயந்திர அல்லது இரசாயன முறைகள் மூலம் பனி அல்லது அறை வெப்பநிலையில் (1g செல் துகள்களில் உள்ளது
109 செல்கள்).
3. என்சைம் சிகிச்சை
எதிர்வினை அமைப்பில் 1-5mM MgCl ஐ சேர்த்து, pH ஐ 8-9 ஆக சரிசெய்யவும்.
1 கிராம் செல் துகள்களை ஜீரணிக்க 250 யூனிட்களின் விகிதத்தின்படி அல்ட்ராநியூக்லீஸைச் சேர்த்து, 30 நிமிடங்களுக்கு மேல் 37℃ இல் அடைகாக்கவும்.தேர்வு செய்ய "பரிந்துரைக்கப்பட்ட எதிர்வினை நேரம்" படிவத்தைப் பார்க்கவும்சிகிச்சையின் காலம்.
4. சூப்பர்நேட்டண்ட் சேகரிப்பு
30 நிமிடங்களுக்கு 12,000 ஆர்பிஎம்மில் மையவிலக்கு செய்து சூப்பர்நேட்டன்ட்டை சேகரிக்கவும்.
குறிப்பு: கரைசல் அமிலமாகவோ அல்லது காரமாகவோ இருந்தால் அல்லது உப்பு, சவர்க்காரம் அல்லது அதிக செறிவுகள் இருந்தால்denaturants, தயவுசெய்து என்சைம் அளவை அதிகரிக்கவும் அல்லது அதற்கேற்ப சிகிச்சை நேரத்தை நீட்டிக்கவும்.
பரிந்துரைக்கப்பட்ட எதிர்வினை நிலைons
| அளவுரு | உகந்த நிலை | பயனுள்ள நிபந்தனை |
| Mg²+ செறிவு | 1-5 மி.மீ | 1-10 மி.மீ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| வெப்ப நிலை | 37℃ | 0-42℃ |
| டிடிடி செறிவு | 0-100 மி.மீ | >0 மிமீ |
| மெர்காப்டோஎத்தனால் செறிவு | 0-100 மி.மீ | >0 மிமீ |
| மோனோவலன்ட் கேஷன் செறிவு | 0-20 மி.மீ | 0-150 மி.மீ |
| பாஸ்பேட் லோன் செறிவு | 0-10 மி.மீ | 0-100 மி.மீ |
பரிந்துரைக்கப்படுகிறது எதிர்வினை நேரம் (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| அல்ட்ரா நியூக்லீஸ் அளவு (இறுதி செறிவு) | எதிர்வினை நேரம் |
| 0.25 U/mL | >10 மணி |
| 2.5 யூ/மிலி | >4ம |
| 25 யூ/மிலி | 30 நிமிடம் |
குறிப்புகள்:
உங்கள் உடல்நலம் மற்றும் பாதுகாப்பை உறுதிப்படுத்த, தேவையான PPE, அத்தகைய ஆய்வக கோட் மற்றும் கையுறைகளை அணியுங்கள்!
