2×ரேபிட் டாக் சூப்பர் மிக்ஸ்
பூனை எண்: HCR2016A
2×ரேபிட் டாக் சூப்பர் மிக்ஸ் மாற்றியமைக்கப்பட்ட டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸை அடிப்படையாகக் கொண்டது, வலுவான நீட்டிப்பு காரணி, பெருக்க மேம்படுத்தல் காரணி மற்றும் உகந்த இடையக அமைப்பு ஆகியவற்றைச் சேர்த்து, சூப்பர் உயர் பெருக்கத் திறனுடன்.3 kb க்குள் உள்ள மரபணு போன்ற சிக்கலான வார்ப்புருக்களின் பெருக்க வேகம் 1-3 நொடி/kb ஐ அடைகிறது, மேலும் 5 kb க்குள் பிளாஸ்மிட்கள் போன்ற எளிய வார்ப்புருக்கள் 1 நொடி/kb ஐ அடைகிறது.இந்த தயாரிப்பு PCR எதிர்வினை நேரத்தை பெரிதும் சேமிக்கும்.அதே நேரத்தில், கலவையில் dNTP மற்றும் Mg2+ உள்ளன, அவை ப்ரைமர்கள் மற்றும் டெம்ப்ளேட்களைச் சேர்ப்பதன் மூலம் மட்டுமே பெருக்க முடியும், இது பரிசோதனையின் செயல்பாட்டு படிகளையும் பெரிதும் எளிதாக்குகிறது.மேலும், கலவையில் எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் காட்டி சாயம் உள்ளது, இது எதிர்வினைக்குப் பிறகு நேரடியாக எலக்ட்ரோபோரேசிஸாக இருக்கலாம்.இந்த தயாரிப்பில் உள்ள பாதுகாப்பு முகவர் கலவையை மீண்டும் மீண்டும் உறைதல் மற்றும் கரைத்த பிறகு நிலையான செயல்பாட்டை பராமரிக்க செய்கிறது.PCR தயாரிப்பின் 3'-இறுதி இசைக்குழு A ஆனது T வெக்டரில் எளிதாக குளோன் செய்யப்படலாம்.
கூறுகள்
2×ரேபிட் டாக் சூப்பர் மிக்ஸ்
களஞ்சிய நிலைமை
PCR மாஸ்டர் மிக்ஸ் தயாரிப்புகள் 2 ஆண்டுகளுக்கு -25~-15℃ இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்.
விவரக்குறிப்புகள்
| தயாரிப்பு விவரக்குறிப்பு | ரேபிட் டாக் சூப்பர் மிக்ஸ் |
| செறிவு | 2× |
| சூடான தொடக்கம் | உள்ளமைக்கப்பட்ட ஹாட் ஸ்டார்ட் |
| ஓவர்ஹாங் | 3′-A |
| எதிர்வினை வேகம் | விரைவு |
| அளவு (இறுதி தயாரிப்பு) | 15 kb வரை |
| போக்குவரத்துக்கான நிபந்தனைகள் | உலர் பனி |
வழிமுறைகள்
1. எதிர்வினை அமைப்பு (50 μL)
| கூறுகள் | அளவு (μL) |
| டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏ* | பொருத்தமானது |
| முன்னோக்கி ப்ரைமர் (10 μmol/L) | 2.5 |
| தலைகீழ் ப்ரைமர் (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×ரேபிட் டாக் சூப்பர் மிக்ஸ் | 25 |
| ddH2O | 50 வரை |
2.பெருக்க நெறிமுறை
| சுழற்சி படிகள் | வெப்பநிலை (°C) | நேரம் | சுழற்சிகள் |
| முற்பிறவி | 94 | 3 நிமிடம் | 1 |
| டினாடரேஷன் | 94 | 10 நொடி |
28-35 |
| அனீலிங் | 60 | 20 நொடி | |
| நீட்டிப்பு | 72 | 1-10 நொடி/கி.பி |
வெவ்வேறு வார்ப்புருக்களின் பரிந்துரைக்கப்பட்ட பயன்பாடு:
| டெம்ப்ளேட் வகை | பிரிவு பயன்பாட்டு வரம்பு (50 μL எதிர்வினை அமைப்பு) |
| ஜீனோமிக் டிஎன்ஏ அல்லது ஈ.கோலை திரவம் | 10-1,000 ng |
| பிளாஸ்மிட் அல்லது வைரஸ் டிஎன்ஏ | 0.5-50 ng |
| cDNA | 1-5 µL (பிசிஆர் எதிர்வினையின் மொத்த அளவின் 1/10க்கு மேல் இல்லை) |
| வெவ்வேறு வார்ப்புருக்களின் பரிந்துரைக்கப்பட்ட பயன்பாடு | |
குறிப்புகள்:
1.ரீஜெண்ட் பயன்பாடு: பயன்படுத்துவதற்கு முன் முழுமையாகக் கரைத்து கலக்கவும்.
2. அனீலிங் வெப்பநிலை: அனீலிங் வெப்பநிலையானது உலகளாவிய Tm மதிப்பாகும், மேலும் ப்ரைமர் Tm மதிப்பை விட 1-2℃ குறைவாகவும் அமைக்கலாம்.
3. நீட்டிப்பு வேகம்: ஜீனோம் மற்றும் ஈ.கோலி போன்ற சிக்கலான டெம்ப்ளேட்டுகளுக்கு 1 நொடி/கேபியை 1 கேபிக்குள் அமைக்கவும்;1-3 கேபி ஜீனோம் மற்றும் ஈ.கோலை போன்ற சிக்கலான டெம்ப்ளேட்டுகளுக்கு 3 நொடி/கேபி அமைக்கவும்;3 kb ஜீனோம் மற்றும் E. கோலைக்கு மேல் உள்ள சிக்கலான டெம்ப்ளேட்டுகளுக்கு 10 நொடி/kb அமைக்கவும்.5 kb க்கும் குறைவான பிளாஸ்மிட் போன்ற எளிய டெம்ப்ளேட்டிற்கு 1 நொடி/kb, 5 முதல் 10 kb வரையிலான பிளாஸ்மிட் போன்ற எளிய டெம்ப்ளேட்டிற்கு 5 நொடி/kb மற்றும் எளிய டெம்ப்ளேட்டிற்கு 10 நொடி/kb என நீங்கள் மதிப்பை அமைக்கலாம். 10 kb க்கும் அதிகமான பிளாஸ்மிட் போன்றவை.
குறிப்புகள்
1. உங்கள் பாதுகாப்பு மற்றும் ஆரோக்கியத்திற்காக, தயவு செய்து லேப் கோட்டுகள் மற்றும் செயல்பாட்டிற்கு செலவழிக்கும் கையுறைகளை அணியுங்கள்.
2. இந்த தயாரிப்பு ஆராய்ச்சி பயன்பாட்டிற்கு மட்டுமே!
