DNase I (Rnase இலவசம்) (2u/ul)
பூனை எண்: HC4007B
DNase I என்பது ஒரு எண்டோநியூக்லீஸ் ஆகும், இது ஒற்றை அல்லது இரட்டை இழை டிஎன்ஏவை ஜீரணிக்கக்கூடியது.இது 5'-பாஸ்பேட் குழு மற்றும் 3'-OH குழுவைக் கொண்ட மோனோ-மற்றும் ஒலிகோடியோக்சிநியூக்ளியோடைடுகளை உருவாக்க பாஸ்போடைஸ்டர் பிணைப்புகளை ஹைட்ரோலைஸ் செய்யலாம்.DNase I இன் உகந்த வேலை pH வரம்பு 7-8 ஆகும்.DNase I இன் செயல்பாடு Ca ஐ சார்ந்துள்ளது2+மற்றும் CO போன்ற இருவேல உலோக அயனிகளால் செயல்படுத்தப்படலாம்2, எம்.என்2+, Zn2+, முதலியன Mg முன்னிலையில்2+, DNase நான் தற்செயலாக இரட்டை இழை DNA எந்த தளத்தையும் பிளவுபடுத்த முடியும்;Mn முன்னிலையில் இருக்கும்போது2+, DNase நான் அதே தளத்தில் டிஎன்ஏ இரட்டை இழையாக பிளவுபடுத்த முடியும், மழுங்கிய முனைகள் அல்லது 1-2 நியூக்ளியோடைடுகள் நீண்டு கொண்டு ஒட்டும் முனைகளை உருவாக்கும்.பல்வேறு ஆர்என்ஏ மாதிரிகளை செயலாக்க இது பயன்படுத்தப்படலாம்.
கூறுகள்
| பெயர் | 1KU | 5KU |
| மறுசீரமைப்பு DNaseI (RNase-இலவசம்) | 500 μL | 5 × 500 μL |
| DNase I எதிர்வினை தாங்கல் (10×) | 1 மி.லி | 5 × 1மிலி |
களஞ்சிய நிலைமை
இந்த தயாரிப்பு 2 ஆண்டுகளுக்கு -25~-15℃ இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்.தயவு செய்து மீண்டும் மீண்டும் உறையவைப்பதைத் தவிர்க்கவும்.
வழிமுறைகள்
ஆர்என்ஏ மாதிரிகளிலிருந்து டிஎன்ஏவை அகற்றுவதற்கு மட்டுமே பயன்படுத்தப்படுகிறது.
1. பின்வரும் எதிர்வினை அமைப்பைத் தயாரிக்க, தயவுசெய்து RNase-இலவச மையவிலக்கு குழாய்கள் மற்றும் குழாய் குறிப்புகளைப் பயன்படுத்தவும்:
| கூறுகள் | தொகுதி (μL) |
| DNase I எதிர்வினை தாங்கல் (10×) | 1 |
| மறுசீரமைப்பு DNasel (RNase-இலவசம்) | 1 |
| ஆர்.என்.ஏ | X |
| RNase-இலவச ddH2O | 10 வரை |
2. எதிர்வினை நிலைமைகள் பின்வருமாறு: 37℃, 15-30 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு, 2.5 mM EDTA கரைசலின் இறுதி செறிவைச் சேர்த்து நன்கு கலக்கவும், பின்னர் 65℃ 10 நிமிடங்களுக்கு.செயலாக்கப்பட்ட டெம்ப்ளேட்டை அடுத்தடுத்த RT-PCR அல்லது RT-qPCR சோதனைகள் போன்றவற்றுக்குப் பயன்படுத்தலாம்.
குறிப்புகள்
1. DNase l உடல் குறைப்புக்கு உணர்திறன் கொண்டது;கலக்கும்போது, சோதனைக் குழாயை மெதுவாகத் திருப்பவும்நன்றாக குலுக்கி, வலுவாக அசைக்காதே.
2. என்சைம் பயன்படுத்தப்படும் போது ஐஸ் பெட்டியில் அல்லது ஐஸ் பாத் மீது சேமிக்கப்பட வேண்டும், பயன்படுத்திய உடனேயே -20℃ இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்.
3. இந்த தயாரிப்பு ஆராய்ச்சி பயன்பாட்டிற்கு மட்டுமே.
4. உங்கள் பாதுகாப்பிற்காக, ஆய்வக பூச்சுகள் மற்றும் செலவழிப்பு கையுறைகளுடன் செயல்படவும்.
